Állatorvos/Zoológus szekció

A pannongyík fokozottan védett állat Magyarországon, és mint minden védett fajnak ismernünk kell a genetikai állományát. Amíg a pannongyík élőhelye és aktivitása gyakrabban kutatott téma a biológusok körében, addig a genetikai állománya még ismeretlen terület.

Kutatásunk során elsődleges célunk volt egy módszer kidolgozása, amely alkalmas a pannongyík-populációk összehasonlító genetikai analízisére.

A vizsgálathoz 70db mintát gyűjtöttünk össze Kárpát-medencei és azon túli területekről (Szerbia, Románia, Bulgária).

Munkánk során két módszert próbáltunk ki: az első vizsgálat a mitokondriális citokróm b szekvencia vizsgálatán alapult, míg a másik egy érzékenyebb DNS-ujjlenyomat technika az ISSR (Inter Simple Sequence Repeat).

A mitokondriális cit b vizsgálatba 17 populáció egy-egy mintáját vontuk be, a vizsgálat során nemzetközileg is ismert primereket alkalmaztunk.

Az ISSR-PCR során 17 darab primert szereztünk be, de a nagyfokú idő és anyagi vonzata miatt, a vizsgálatot 3 populációra csökkentve demostráltuk (Sas-hegy, Odvas-hegy, Nagymaros). A területeket földrajzi elhelyezkedésük alapján válaszottuk ki.

A két vizsgálat során eredményt csak az egyiknél kaptunk. A mitokondriális cit b vizsgálat során PCR-terméket nem tudtunk detektálni a PCR-oldatból. Mivel a DNS-izolálás után a kinyert DNS-t gél-elektroforézissel ki tudtuk mutatni, így a hiba a PCR során történhetett. Valószínüleg a primer nem tudott bekötődni a DNS szálhoz.

Az ISSR-vizsgálat során sikerült PCR –terméket kinyernünk, ezt gél-elektroforézissel detektáltuk, majd a gél lefényképeztük és kiértékeltük. A kiértékelt gélképekből jelenlét-hiány mátrixot készítettünk, majd abból SYN-TAX programcsomaggal fenogramot állítottunk fel.

A fenogram világosan megmutatta a Duna elválasztó szerepét a populációk keveredése között.

Kimutattuk az ISSR-PCR működését a pannongyíkra, mely előrevetíti egy nagyobb genetikai vizsgálat lehetőségét. A populációk közötti genetikai különbségek alapján felderíthetők a populációk közötti kapcsolatok és leszármazási útvonalak.