Biológus szekció

A primordiális csírasejtek (PG sejtek, ősivarsejtek) a csíravonal prekurzorai, melyek a későbbi differenciáció során érett pete-, illetve hímivarsejtekké válnak. A X. stádiumú embrió epiblasztjában helyezkednek el, majd innen a germinális félholdba vándorolnak, ahol osztódni kezdenek. 48-56 órán belül amoeboid mozgással a véráramba kerülnek. A keringés utóbéli szakaszán elhagyják az ereket, kemotaxis segítségével az ivarlécekbe jutnak.

A PG sejtek a 2 napos embriók dorzális aortájából izolálhatóak, ezt követően in vitro sejttenyészetben fenntarthatóak, illetve fagyasztással tárolhatóak.

A madarak, így a házityúk esetében is, a nőstények ZW, a hímek ZZ ivari kromoszómákkal rendelkeznek. Régebben csak ZZ genotípusú hímekből származó ősivarsejt tenyészeteket tudtak fenntartani, mára azonban sikerült egy olyan speciális tenyésztőmédiumot kifejleszteni, mellyel a nőstény embriókból izolált PG sejttenyészetek is fenntarthatók. Csoportunk arra volt kíváncsi, hogy a laborunkban fenntartott hím (ZZ) és nőstény (ZW) tenyészetek között van-e különbség.

Munkám során hím, illetve nőstény házityúk primordiális csírasejt tenyészeteken vizsgáltam a pluripotencia markerek expresszióját, illetve az azokat befolyásoló mikroRNS-eket. Az expressziós mintázat megfigyelésével lehetővé vált a sejttenyészetekben bekövetkező változások észlelése.

A donor embriókból sex PCR segítségével ivarmeghatározást végeztünk. Az ivar meghatározását követően 5 hím (ZZ genotípusú) PGC tenyészetet illetve 5 nőstény (ZW genotípusú) PGC tenyészetet kevertünk össze (pool-oztunk). Két heti tenyésztést követően a ZZ, illetve ZW pool-okat lefagyasztottuk. A fagyasztásból visszavett tenyészetekből különböző időpontokban mintát vettem, majd RNS izolálás után kvantitatív PCR-t használva vizsgáltam a Cvh, cPouv, cNanog és miR-302a expresszióját.

A kapott eredményeket összehasonlítva nem találtunk szignifikáns különbséget a nőstény (ZW genotípusú), illetve a hím (ZZ genotípusú) sejttenyészetek ősivarsejt specifikus markereinek expressziójában. Az eredményünk igazolása képen, 3 napos embriók vérkeringésébe visszainjektáltuk a tenyészetekből származó sejteket. Mind a két ivar esetén beépülést tapasztaltunk. További terveink között szerepel a kevert (hím és nőstény ősivarsejteket is tartalmazó) sejttenyészetek vizsgálata.

Munkánk a génmegőrzés szempontjából jelentős. A PG sejteket egy recipiens állatba visszainjektálva ivarszervi kimérákat hozhatunk létre. Kipusztulással fenyegetett, illetve őshonos madárfajok megőrzése válhat lehetővé a PG sejteknek köszönhetően.