Biológus szekció

A hipofízis adenilát cikláz aktiváló polipeptidet (PACAP) antiapoptózis hatásának és a szervezetben belüli nagymértékű elterjedésének köszönhetően általános citoprotektív peptidként tartjuk számon. Mivel jelentős mennyiségben megtalálható a gonádokban is, így feltételezhető, hogy a PACAP központi szerepet játszhat a reprodukciós folyamatokban.

Kutatásunk célja, hogy tanulmányozzuk az endogén peptid hatását az embrió fejlődésére és minőségére, PACAP génhiányos (KO) egerekkel összehasonlítva. Valamint radioimmunoassay (RIA) technikával megvizsgáljuk a PACAP progeszteron és ösztradiol termelésre gyakorolt hatását.

A vizsgálatainkat CD1 egértörzsön, vad típusú és PACAP KO egereken végeztük. A nőstényeket szuperovuláltattuk (7,5 NE PMSG, 48 óra elteltével 7,5 NE hCG), majd a hCG injekciót követően egy éjszakára a PACAP KO nőstényt PACAP KO hímhez, a vad típusú nőstényt vad típusú hímhez helyeztünk. A zigótákat a párzást követő reggelen nyertük ki, majd G1 tápfolyadékban 96 órán keresztül in vitro tenyésztettük őket. Ezt követően megvizsgáltuk a fejlődési állapotot, blasztociszta arányt, SYBR14 festéssel meghatároztuk a sejtszámot, valamint a fejlődési stádiumnak megfelelő morfológiájú embriókban ellenőriztük a blasztomerek kromatin állományát. Kutatásunk másik vizsgálata a nőstények ciklusdiagnosztikája. 21 napon keresztül naponta gyűjtött bélsárból RIA technikával határoztuk meg 5 KO és 5 vad egyed progeszteron és ösztradiol hormonjának napi termelődési mennyiségét.

A két csoport nőstényeinek hormonszintjében eltérés mutatkozott. Míg az ösztradiol szint közel megegyezett és a csúcsértékek is egy időben jelentkeztek, addig a progeszteron szint a KO egerek esetében magasabb értékeken mozgott a vadakéhoz képest.

A PACAP KO egerek magasabb progeszteron szintjének okát és következményét további vizsgálatokkal szeretnénk megállapítani, így terveink között szerepel az embrió beültetés és a beágyazódási markerek analizálása.