Szekciók

Vízibaromfi fajokat fertőző baktériumok a Mycoplasma anatis, a M. anseris, a M. cloacale és a M. sp. 1220. Társfertőzésben vagy akár önállóan is súlyos megbetegedéseket, ennek következtében pedig jelentős gazdasági károkat okozhatnak. A fertőzött lúd vagy kacsa állományokban kloákagyulladás, a nemi szervek gyulladása, csökkent tojástermelés, gyakoribb embrió elhalás és légzőszervi megbetegedések a főbb tünetek. Kimutatásuk elsősorban a biokémiai tulajdonságaikon alapuló tenyésztéssel és egy nemzettség-specifikus polimeráz-láncreakció (PCR) rendszerrel lehetséges. Problémát okoz azonban, hogy ezek a fajok gyakran együtt fordulnak elő, biokémiájuk és genetikai felépítésük pedig rendkívül hasonló. Ezáltal szükség van olyan megbízható, a rutin diagnosztikában is használható molekuláris módszerekre, amelyek segítik a pontos faji meghatározást, ezáltal segítve a célzott terápia kiválasztását. A dolgozat célja a M. anatis, a M. anseris, a M. cloacale és a M. sp. 1220 kimutatására alkalmas fajspecifikus PCR rendszerek tervezése és tesztelése volt.

A fajspecifikus PCR rendszerek tervezésénél madár patogén Mycoplasma fajok génjeinek egymás alá illesztését követően a M. anatis és a M. cloacale fajoknál a DNS polimeráz III gamma/tau alegység-et kódoló génre, a M. anseris esetében az ATP-függő DNS helikáz PcrA-t kódoló génre, míg a M. sp. 1220 fajnál a DNS-függő RNS polimeráz béta alegységet kódoló génre primer párok lettek tervezve. A PCR rendszerek specificitását 16 madár patogén Mycoplasma faj típus törzsén, 2011 és 2018 között, főleg Magyarország területéről gyűjtött 57 klinikai izolátumon, továbbá kacsából és lúdból származó 28 klinikai mintán teszteltük. A vizsgálatok során a tervezett rendszerek specifikusnak mutatkoztak, keresztreakciót nem tapasztaltunk. A PCR rendszerek érzékenyek, 101-102 DNS templát kimutatását is lehetővé teszik.

A primerek azonos olvadási hőmérséklete miatt a PCR-ek azonos hőprofilon futtathatók, így több minta egyidejű vizsgálata is lehetséges. A fejlesztett fajspecifikus PCR rendszerek lehetővé teszik, hogy akár már közvetlenül a klinikai mintákból rövid idő alatt azonosíthassuk a vízibaromfi patogén Mycoplasma fajokat.