Szekciók

Tejhasznú szarvasmarha telepeken világszerte az egyik legjelentősebb gazdasági és élelmiszerhigiéniai károkat okozó megbetegedés a szubklinikai tőgygyulladás. A Pseudomonas aeruginosa a klinikum szempontjából jelentős kórokozó, mivel biofilmtermelő tulajdonsága számottevően megnehezíti, gyakran ellehetetleníti a beteg állatok kezelését. A sikeres gyógykezelés kulcsa, hogy elősegítsük az antibiotikumok bejutását a biofilm mélyebb rétegeibe, így az ott lévő baktériumsejteket is képes legyen elpusztítani. Kutatásunkban olyan hatóanyagokat kerestünk, melyek önállóan vagy antibiotikummal kombinálva jelentős antimikrobiális és biofilmfeltörő képességet mutatnak. Vizsgálataink során három növényi illóolaj: a geraniol, timol és fahéjaldehid, továbbá a tris-EDTA, az N-acetilcisztein (NAC), valamint egy fluorokinolon antibiotikum biofilmellenes és antimikrobiális hatását vizsgáltuk.

Kutatásunk során szubklinikai tőgygyulladásból izolált P. aeruginosa törzseket vizsgáltunk. A biofilmfeltörő képességet MTS-formazán (metil-tetrazólium só) vitális festés segítségével állapítottuk meg, melyhez először a baktériumtörzseket 37°C-on, 24 órán keresztül inkubáltuk 96-lyukú lemezeken. A termelődött biofilmet a hatóanyagok kettes alapú hígítási sorával kezeltük, majd 37°C-on, újabb 24 órán keresztül inkubáltuk. Az MTS festést követően a lemezeket 492 nm fényelnyelési maximumú spektrofotométer segítségével vizsgáltuk, majd a pozitív kontrollhoz viszonyítva következtettünk a biofilmfeltörés mértékére. A hatóanyagok feltételezett antimikrobiális hatásának vizsgálatát azok MIC- (minimális gátló koncentráció) értékeinek megállapításával végeztük.

Az általunk vizsgált három növényi illóolaj, a fluorokinolon antibiotikum és a tris-EDTA in vitro kísérleteink során képes volt hatékonyan feltörni a P. aeruginosa törzsek által termelt biofilmeket. A biofilmfeltörés mértékét százalékban fejeztük ki és ahol a csökkenés mértéke elérte az 50%-ot, ott határoztuk meg az EC50 értéket. A geraniolnál átlagosan 1,13 mg/ml, a fahéjaldehidnél 0,62 mg/ml, a timol 2,63 mg/ml, a fluorokinolon antibiotikum 1,01 µg/ml, míg a tris-EDTÁ-nál 1,38 mg/ml-es EC50 értékeket állapítottunk meg. A fluorokinolon származék 1-2 µg/ml, míg az illóolajok esetében 0,5-4 mg/ml, a tris-EDTA esetén pedig 1-2 mg/ml közötti MIC-értékeket állapítottunk meg. Eredményeink alapján elmondható, hogy a geraniol, timol, fahéjaldehid, valamint a tris-EDTA hatékonyak lehetnek a P. aeruginosa okozta szubklinikai tőgygyulladás kezelésében. A kísérleteinkben vizsgált hatóanyagok nem veszélyesek a fogyasztóra, továbbá növelhetik az antibiotikumterápia sikerességét, így csökkentve a gyógyszer-maradványanyagok szintjét az élelmiszerláncban.