Szekciók

Az antibiotikumok túlzott, és sok esetben nem megfelelő használata miatt a baktériumokban velük szemben kialakult rezisztencia napjaink egyik legjelentősebb problémája a humán- és állatgyógyászatban egyaránt. Rezisztens baktériumok nagy arányú jelenléte fertőzések során az antibiotikumos kezelések sikertelenségéhez vezethet, amely különösen jelentős probléma zoonotikus baktériumok, például Escherichia coli és Salmonella enterica ser. Typhimurium által okozott megbetegedések esetén. A jelenség leküzdése csak az ‘Egy Egészség’ (‘One Health’) koncepcióval lehet sikeres, amelynek lényege, hogy az állat- és humánegészségügy szereplői együttesen keresnek megoldásokat az antibiotikumok használatának csökkentésére és optimalizálására, valamint bakteriális fertőzések megelőzésére vagy kezelésére használható potenciális antibiotikum-alternatívákat. A flavonoidok közé tartozó proantocianidinok (PAC-ok) biológiailag aktív növényi vegyületek, amelyek antioxidáns, gyulladáscsökkentő és antibakteriális tulajdonságaik alapján alkalmasak lehetnek erre a célra.

Kutatásunk célja az volt, hogy megvizsgáljuk a szőlőmag eredetű PAC-ok védő hatásait egy gasztrointesztinális fertőzéseket modellező in vitro rendszerben, amely sertésekből izolált bélpatogén baktériumokból (E. coli és S. Typhimurium), valamint sertés eredetű bélhámsejtekből (IPEC-J2 sejtvonal) állt. Ezen ko-kultúra létrehozásához elsőként Neutral Red festéssel meghatároztuk a legnagyobb tolerálható baktériumkoncentrációt, amely a sejteken alkalmazva nem okoz szignifikáns életképesség csökkenést. Ezt követően a sejteket E. coli-val és S. Typhimurium-mal kezeltük önállóan, vagy PAC-okkal kombinálva (50 és 100 µg/ml koncentrációban), majd meghatároztuk a sejtek intracelluláris reaktív oxigén származék szintjét (IC ROS) 2’,7’diklór-dihidro-fluoreszcein-diacetát (DCFH-DA) reagenssel, valamint interleukin-6 (IL-6) és interleukin-8 (IL-8) termelését enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálattal (ELISA).

Egy órás kezelés során az E. coli és S. Typhimurium törzsek 10⁶ CFU/ml koncentrációjú szuszpenziója nem befolyásolta az IPEC-J2 sejtek életképességét, így a további vizsgálatokhoz ilyen töménységű baktériumszuszpenziót alkalmaztunk. A PAC-ok 50 és 100 µg/ml koncentrációban, baktériumokkal együtt alkalmazva csökkenteni tudták az IPEC-J2 sejtek IC ROS szintjét. Ezen túl a S. Typhimurium-mal történő kezelés a sejtek IL-8 és IL-6 termelésének növekedését okozta, amely szintén enyhíthető volt PAC-ok alkalmazásával.

Eredményeink alapján elmondható, hogy a szőlőmag eredetű PAC-ok képesek csökkenteni az oxidatív stressz és a gyulladás markereinek mennyiségét baktériumokkal kezelt sertés bélhám sejtkultúrában. Ezen megfigyelések alapján a PAC-ok alkalmasak lehetnek sertések bakteriális bélfertőzéseinek megelőzésére és kezelésére, de további in vitro és in vivo vizsgálatok szükségesek alkalmazhatóságuk alátámasztására.