Szekciók

A tripszinszerű szerin proteázok olyan enzimek, amelyek a szervezetben számos fiziológiás és patológiás folyamatban működnek közre, így gátlásuk meghatározó farmakológiai jelentőséggel bírhat többek között daganatos vagy virális megbetegedések elleni hatékony küzdelemben. Kutatásunkban négy matriptáz/TMPRSS2 gátló (MI) 3-amidinofenilalanin típusú vegyület (MI-432, MI-463, MI-482 és MI-1900) hatását vizsgáltuk különböző fajokból (humán, patkány, beagle és cynomolgus majom) származó mikroszómákon a citokróm P450 (CYP) izoenzimek (CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19 és CYP3A4) aktivitására, valamint meghatároztuk és fajonként összehasonlítottuk ultranagy teljesítményű folyadékkromatográfia módszerrel és tömegspektrometriás detektálással a 3-amidinofenilalanin típusú vegyületek mikroszomális fogyási százalékát.

Mikroszomális CYP1A2 aktivitás vizsgálata során patkánynál az MI-463 és az MI-1900, beagle mikroszómán az MI-432 és az MI-482, majom esetében pedig mind a négy alkalmazott gátlószer szignifikánsan csökkentette a fluoreszcencia intenzitást. Kísérleti adataink szerint a vizsgált 3-amidinofenilalanin típusú vegyületek 50 µM koncentrációban nem csökkentették szignifikánsan a humán mikroszomális CYP1A2, CYP2C9 és CYP2C19 aktivitását, azonban a CYP3A4 aktivitását mind a négy alkalmazott MI vegyület jelentős mértékben gátolta, a közepes gátló koncentráció (IC50) értékek a vizsgált gyógyszerjelöltek esetében 1 µM alatt maradtak (MI-432: 0,39 µM± 0,09 µM, MI-463: 0,21 µM± 0,03 µM, MI-482: 0,30 µM± 0,07 µM, MI-1900: 0,63 µM± 0,04 µM).

A vegyületek fogyási százalékát humán mikroszómán vizsgálva megállapítást nyert, hogy az MI-432 és MI-1900 alakult át legnagyobb mértékben, ezen kívül szignifikáns különbséget találtunk MI-463 és MI-1900 valamint MI-482 és MI-1900 fogyási százalékai között. Fajok közötti különbségeket vizsgálva kiderült, hogy MI-432, MI-463 és MI-1900 átalakulásában nem, MI-482 CYP1A2 által közvetített biotranszformációjában azonban mutatkozik számottevő mértékű különbség majom és beagle mikroszóma között.

Összefoglalva, kutatásuk során igazolódott, hogy az in vitro antivirális hatással rendelkező, általunk vizsgált 3-amidinofenilalanin típusú vegyületek egyes izoenzimek (CYP1A2 és CYP3A4) működésére fajfüggő gátló hatással rendelkeznek, amely szükségessé teheti további in vivo vizsgálatok elvégzését a gyógyszerinterakciós potenciál előrejelzése céljából.