Szekciók

• Alaptudományi előadások: Tolnay terem
• Alkalmazott tudományi előadások: Aula

Az Aspergillus és Penicillium spp. által termelt ochratoxin A (OTA) a gabonaalapú élelmiszereket és takarmányokat szennyezheti, szájon át történő fogyasztása súlyos gyomor-bélrendszeri, vese- és májbetegségeket okozhat mind az emberekben, mind a haszonállatokban. A Gram-negatív baktériumokban található lipopoliszacharidok (LPS-ok) szintén krónikus bélgyulladást és májkárosodást képesek előidézni. A növényi eredetű flavonoidok, mint a krizin (CHR) és a luteolin (LUT) azonban gyulladáscsökkentő és antioxidáns hatásúak.

Ebben a tanulmányban újszülött malacokból származó IPEC-J2 sejteket, valamint minisertés hepatocitákat használtunk az OTA/LPS 24 órás hatásának vizsgálatára és az alkalmazott flavonoidok jótékony hatásainak szűrésére. Az IPEC-J2 sejteket OTA-val (1 µM, 5 µM és 20 µM), LPS-sel (10 µg/ml), CHR-nel (1 µM) vagy LUT-nal (2,5 µg/ml) kezeltük önmagukban vagy kombinációkban. A minisertés májsejtekhez OTA-t (20 µM) adtunk CHR (100 nM, 500 nM, 1000 nM) hiányában és annak jelenlétében is. A sejtek életképességének meghatározására MTS tesztet (IPEC-J2 sejtekben) és CCK-8 tesztet (minisertés májsejtekkel) végeztünk, az extracelluláris (EC) hidrogén-peroxid (H2O2) szint változásának nyomonkövetésére Amplex red technikát alkalmaztunk. Az intracelluláris (IC) reaktív oxigénfajtákat (ROS) a 2'-7'-dikloro-dihidrofluoreszcein-diacetát (DCFH-DA) módszerrel vizsgáltuk. Az IPEC-J2 sejtek IL-6 és IL-8 termelésének értékelésére ELISA kitet használtunk.

Kísérleti eredményeink szerint megállapítható, hogy az OTA csökkentette a sejtek életképességét mind az IPEC-J2 sejtekben, mind a minisertés hepatocitákban (p<0.001), amit nem tudott kompenzálni sem a LUT, sem a CHR (p>0.05), azonban az EC H2O2 termelést hatékonyan mérsékelte a LUT az IPEC-J2 sejtekben (p<0.001) és a CHR a minisertés májsejtekben (p<0.01). Az OTA LPS-sel kombinálva jelentősen megemelte az IC ROS-t, amit a CHR és az LUT sikeresen ellensúlyozott (p<0.001). Az IL-6 és IL-8 gyulladásos citokinek szekrécióját az LPS+ OTA megemelte (p<0.001), amit a LUT sikeresen csökkentett (IL-6 p<0.01; IL-8 p<0.001).

Kutatási adataink alapján a CHR és a LUT jótékony hatást gyakoroltak az IC ROS szintjére, valamint a vizsgált citokinek termelődésére (LUT) in vitro. Ezeket a flavonoidokat a jövőben étrend- és takarmánykiegészítőként lehetne használni az OTA és az LPS által okozott egészségügyi károsodások elkerülése érdekében az emberekben és a haszonállatokban egyaránt további in vivo biztonsági vizsgálatok elvégzését követően.