Szekciók

• Alaptudományi előadások: Tolnay terem
• Alkalmazott tudományi előadások: Aula

A T-2 toxin Fusarium gombafajok által termelt trichotecénvázas mikotoxin. E gombafajok gyakran fertőznek meg különféle gabonanövényeket, és a belőlük előállított élelmiszeripari termékeket. A szárnyasok különösen kitettek a T-2 toxin okozta mikotoxikózisnak, mivel nagyrészt gabonaalapú takarmányt fogyasztanak. A toxin genotoxikus, citotoxikus és immunmoduláló hatást is kifejt az állatokban, ami a termelékenység csökkenéséhez vezethet. A toxin legjelentősebb sejtszintű hatása a fehérjeszintézis gátlása, emellett oxidatív stresszt is kiválthat, amely endoplazmatikus retikulum (ER) stressz kialakulásához vezethet. Mindezek miatt a T-2 toxin sejtszintű hatásainak vizsgálata rendkívül fontos a mezőgazdaság és az állatgyógyászat számára egyaránt.

Munkánk során a T-2 toxin májsejtekre gyakorolt hatását vizsgáltuk csirke eredetű háromdimenziós (3D) hepatocita – nem-parenchimális (NP) sejt ko-kultúrákban. A sejttenyészeteket háromféle (100, 500 és 1000 nM) T-2 toxin koncentrációval történő kezelésnek tettük ki különböző ideig (24 és 48 óra). A sejtek metabolikus aktivitását CCK-8 (Cell Counting Kit-8) teszt segítségével határoztuk meg. Az oxidatív stressz és az ER stressz vizsgálatához a sejtek lizátumából a protein-karbonil (PC), a tápfolyadékból pedig a malondialdehid (MDA), valamint a glükóz-szabályozott fehérje-78 (GRP78) és a hősokkfehérje-27 (HSP27) mennyiségét csirkespecifikus ELISA-tesztekkel mértük.

Eredményeink azt mutatták, hogy a T-2 toxin az összes kezelési csoportban szignifikánsan csökkentette a metabolikus aktivitást mindkét inkubációs időt követően. A hosszabb inkubációs idő alkalmazása során a metabolikus aktivitás csökkenése kisebb mértékű volt, amely a máj-eredetű sejtek metabolikus adaptációjára utalhat. Az MDA termelődést 24 óra után csak az 1000 nM T-2 toxin csökkentette szignifikánsan, 48 óra után azonban már mindhárom kezelési koncentráció kifejtette ezt a hatást. A magasabb koncentrációban alkalmazott toxin 48 órás kezelést követően szignifikánsan csökkentette a sejtek PC koncentrációját. A GRP78 szintje nem változott szignifikánsan a sejttenyészetekben. A HSP27 mennyiségét 48 óra után minden alkalmazott T-2 toxin koncentráció szignifikánsan csökkentette.

Eredményeink alapján elmondható, hogy a T-2 toxin kis mértékben csökkentette a sejtek metabolikus aktivitását, de nagyobb koncentrációban és hosszabb ideig alkalmazva az in vivo körülményeket jól tükröző 3D ko-kultúra modellünkben a toxin védekező mechanizmusokat is indukált a sejtekben, amelyek az oxidatív és esetlegesen az ER stressz csökkenését is eredményezhették.