|
|||||||||||||||
|
Home
» Állatorvos szekciók
Állatorvos szekciókSzabó Julianna Flóra V. évfolyam Állatorvostudományi Egyetem, Állathigiéniai, Állomány-egészségtani Tanszék és Mobilklinika Témavezetők: Dr. Berlinger Balázs, Dr. Andócs Gábor A platinaszármazékok alkalmazása különböző daganatos betegségek terápiájában több évtizedes múltra tekint vissza. Ugyanakkor klinikai használatukban komoly akadályt jelent az egészséges sejtekben való akkumuláció okozta toxicitás, valamint az egyes rákos sejtek által mutatott rezisztencia. Korábbi kutatások sikerrel vizsgálták a ciszplatin és a karboplatin sejttranszport-mechanizmusait, antineoplasztikus hatását és toxicitását, viszont az egyes sejtek platinafelvételének számszerűsítése egészen néhány évvel ezelőttig technológiai akadályokba ütközött. A jelen kutatásban alkalmazott SC-ICP-MS (single cell inductively coupled plasma mass spectrometry) módszer ezekre jelenthet megoldást. Kísérleti munkánk fő célkitűzése, hogy az SC-ICP-MS technológia segítségével tumoros és egészséges sejtvonalakon vizsgáljuk a különböző koncentrációban alkalmazott ciszplatin- és karboplatin-kezelés hatását. A kísérletekben két egér eredetű karcinóma-sejtvonalat, a C26-ot (kolorektális karcinóma) és 4T1-et (emlőkarcinóma), valamint egy kutya veséből származó egészséges hámsejt-vonalat, az MDCK-t használtuk. A sejttenyészeteket 24 órán át exponáltuk ciszplatin és karboplatin különböző koncentrációival (10, 20 és 40 μM), majd háromszor átmostuk és lecentrifugáltuk. A sejttenyészetek morfológiai változásait Olympus IX70 inverz fáziskontraszt-mikroszkóppal, a sejtszámot pedig Merck ScepterTM 3.0 sejtszámlálóval monitoroztuk. A sejtek fémkomplex-felvételét és a komplexek sejtek közti eloszlását Perkin Elmer NexION2000 készülékkel vizsgáltuk. A mérési eredmények értékelése során azt tapasztaltuk, hogy a különböző sejtvonalak azonos platinakomplex expozíciók mellett különböző mértékben vettek fel platinát, a nagyobb gyógyszerkoncentrációk pedig növelték a sejteken belül mért platina mennyiségét. Ez utóbbi összefüggés több sejtvonal esetén egyenesen arányos volt bizonyos koncentráció tartományokban. A ciszplatinnal kezelt sejtekben a platina nagyobb koncentrációt ért el, és több sejt által került felvételre, mint a karboplatinnal kezeltekben. Szintén ciszplatin hatására adott koncentrációszint felett látványos sejthalált figyeltünk meg minden sejtvonal tenyészeteiben, amely a sejtek fragmentációjához vezetett. Ezt az SC-ICP-MS módszer a sejtszám növekedéseként érzékelte. A jelenséget kiváltó expozíció nagyobb volt 4T1-ben és MDCK-ban, mint C26-ban, ami ezen sejtvonalak nagyobb ellenállóképességét demonstrálja a platina citotoxikus hatásaival szemben. A karboplatinnal kezelt tenyészetekben nem tapasztaltunk morfológiai elváltozásokat, és a fragmentáció jelenléte sem volt bizonyítható. Ez azt mutatja, hogy a ciszplatin sejtkárosító hatása azonos koncentrációk esetén nagyobb, mint a karboplatiné. Az eredményeink alátámasztják számos korábbi kutatás eredményeit, valamint a kérdéses szerekkel kapcsolatos klinikai tapasztalatokat. Előadások listája A TDK konferencia online absztraktfüzete megtekinthető itt. |