Szekciók

A lovak virémiával járó kórképei esetén a fertőzés kiváltotta korai gyulladásos válasz fontos szerepet tölt be a betegség kórfejlődésében és egészségkárosító hatásában, hozzájárulva a rossz általános állapothoz és egyes szervek károsodásához, ezáltal jelentősen rontva a kórjóslatot. Kutatásunk fő célja egy olyan, ló eredetű primer in vitro modell kidolgozása volt, amely a vérben jelen lévő sejtek és humorális összetevők kölcsönhatásait megtartva alkalmas a szisztémás gyulladásos- és oxidatív stresszválasz vizsgálatára. A létrehozott sejtmodellt a virális RNS-analóg poliinozin-policitidilsavval (poly I:C-vel) kezelve kívántunk gyulladásos citokinválaszt kiváltani, majd a kurkumin alkalmazásával annak immun- és redoxmoduláló hatásait terveztük vizsgálni.

Egy egészséges, hatéves Furioso kanca véréből teljesvér-kultúrákat hoztunk létre, melyeket 10 és 50 µg/ml poly I:C-vel, valamint 0,3 és 30 µg/ml kurkuminnal, illetve ezek kombinációival inkubáltunk 12 órán keresztül. Ezután a felülúszóból meghatároztuk a laktát-dehidrogenáz (LDH) aktivitását, számos gyulladásos mediátor koncentrációját és a hidrogén-peroxid mennyiségét.

A poly I:C mindkét koncentrációban – az extracelluláris LDH-aktivitás sejtkárosodásra utaló emelkedése nélkül – növelte az interleukin (IL)-1β, az interferon-γ-indukált fehérje-10 (IP-10) és a tumornekrózis faktor-α (TNF-α), míg magasabb dózisban az IL-6 és az interferon-γ (IFN-γ) koncentrációját, azaz következetes, markáns gyulladásos citokinválaszt váltott ki. A kurkumin a poly I:C-vel együtt alkalmazva tovább fokozta az IL-6- és TNF-α-választ, egyes csoportokban pedig az IL-1β és az IP-10 koncentrációját is növelte. A magasabb dózisú kurkuminkezelés ugyanakkor mindkét poly I:C-expozíció mellett csökkentette a felülúszó hidrogén-peroxid-koncentrációját.

Eredményeink alapján a létrehozott ló eredetű primer teljesvér-kultúrában hatékonyan váltottunk ki gyulladásos választ poly I:C segítségével. A modellben a kurkumin körülményektől függő immun- és redoxmoduláló aktivitást fejtett ki, így egyidejű poly I:C-expozíció mellett tovább növelte a gyulladásos citokincsúcsokat, miközben a magasabb dózisban csökkentette az extracelluláris hidrogén-peroxid-koncentrációt, ami antioxidáns hatásra utal. Modellünk így alkalmas lehet a lovak virémiával járó kórképei során megfigyelhető heveny szisztémás gyulladásos válasz molekuláris szintű tanulmányozására, valamint egyes alternatív, új immun- és redoxmodulátor hatóanyagok működésének in vitro vizsgálatára.