Szekciók

A kutyák krónikus enteropátiája (chronic inflammatory enteropathy, CIE) legalább három hete fennálló gasztrointesztinális tünetekkel járó, multifaktoriális hátterű kórkép, amelynek kialakulásában a nyálkahártya immunrendszere, a környezeti tényezők, a genetikai hajlam és a bél mikrobiomjának egyensúlyzavara egyaránt szerepet játszhat. Kezelésének alapját a különböző diéták képezik, súlyosabb esetekben pedig immunszupresszív terápia alkalmazható. A természetes eredetű, gyulladáscsökkentő és antioxidáns hatású vegyületek ígéretes kiegészítő terápiás lehetőséget jelenthetnek, vizsgálatukhoz azonban megbízható in vitro bélgyulladás-modellekre van szükség.

Kutatásunk célja egy stabil, reprodukálható kutya CIE-modell létrehozása volt, amely alkalmas gyulladáscsökkentő és antioxidáns hatású vegyületek vizsgálatára. A kísérletekhez kutyák gasztroenteroszkópos vizsgálata során nyert duodenum-explantátumokat használtunk. Az optimális tenyésztési idő meghatározása során 12 órán keresztül követtük a szöveti integritás változását LDH-aktivitásméréssel és kórszövettani vizsgálattal. Az így meghatározott optimális tenyésztési körülmények között ezt követően bakteriális eredetű lipopoliszacharidokkal (LPS) végzett stimulációs kísérleteket végeztünk.

A gyulladásos folyamatok indukálására két E. coli és két Salmonella eredetű LPS-t alkalmaztunk. A kiváltott gyulladás mértékét az extracelluláris H2O2, valamint a TNF-α és IL-6 szintjének meghatározásával vizsgáltuk, míg az explantátumok életképességét LDH-aktivitásméréssel követtük. A minták eltérő méretének kiküszöbölésére az eredményeket a BCA-módszerrel meghatározott teljes fehérjetartalomra normalizáltuk.

Az LPS-kezelések egyike sem befolyásolta szignifikánsan az LDH-aktivitást. Az extracelluláris H2O2 szintje Salmonella Typhimurium kezelés hatására szignifikánsan emelkedett. A TNF-α szintje mind S. Typhimurium-, mind S. Enteritidis-kezelés esetén szignifikánsan magasabb volt a kontrollhoz képest, míg az IL-6 szignifikáns emelkedését kizárólag S. Enteritidis-kezelést követően figyeltük meg.

Eredményeink alapján az in vitro modell alkalmas lehet a kutya bélnyálkahártyájának gyulladásos vizsgálatára. A Salmonella eredetű LPS-ek kifejezettebb gyulladásos választ váltottak ki, így ígéretesebb stimulánsnak bizonyultak a modellben. A rendszer alkalmas lehet potenciális gyulladáscsökkentő és antioxidáns vegyületek vizsgálatára.