|
||||
Home
» Archívum
» 2012. TDK
2012. évi TDK konferenciaPettersson, Kim VI. évfolyam SzIE, Állatorvos-tudományi Kar, Anatómiai és Szövettani Tanszék Témavezetők: Dr. Halasy Katalin, Szőke Balázs A melanin koncentráló hormon (MCH) 19 aminosavból álló ciklikus peptid, melyet először a hal hypophysisből izoláltak, ahol a kültakaró pigmentációját szabályozza. Az emlősökben egyebek között a táplálékfelvétel szabályozásában vesz részt. MCH-t expresszáló neuronokat a lateralis hypothalamusban, és a zona incertában találtak, ezek axonjai azonban sok más agyterületen is jelen vannak. A hypothalamikus szabályozó centrumokról ismert, hogy reciprok kapcsolatban állnak a lateralis septummal (LS). Előzetes tanulmányaink szerint az LS gazdag számos orexigén és anorexigén neuropeptidben, többek között galaninban, neuropeptid Y-ban, opioid peptidekben és CART peptidben. Táplálékmegvonási kísérletek szerint az immuncytokémiailag detektálható peptid-tartalmú axonhálózatok denzitása szelektíven nő, ill. csökken részleges táplálékmegvonás hatására. Mivel az MCH is egy jól ismert orexigén peptid, munkánk célja volt, hogy felderítsük az MCH-tartalmú idegelemek denzitásbeli változásait részleges táplálékmegvonásra. Fiatal felnőtt Wistar patkányokat alkalmaztunk kísérleteinkben. A kontroll állatok ad libitum hozzájuthattak közönséges patkánytáphoz és ivóvízhez, míg a kísérleti csoport tagjai csak a napi átlagos fogyasztás 60 %-át kapták egy héten keresztül. Ezután az állatokat altatásban a szíven keresztül perfúziósan fixáltuk 4 % paraformaldehydben (0.2 M foszfátpufferben hígítva, pH 7.4), a septalis agyrészből 70 mikron vibratom sorozatmetszeteket készítettünk és a free floating preembedding immuncytokémiai protokoll szerint processzáltuk. A primér antiszérum nyúl anti MCH (SIGMA) 1:10 000 hígításban, a szekunder antiszérum biotinilált anti-nyúl IgG, majd avidin-biotin-peroxidáz komplex (Vector), mindkettő 1:100 hígításban, a kromogén pedig DAB volt. A fénymikroszkópos digitális felvételeket számítógépes denzitometriás programmal (Scion Image) értékeltük. Néhány metszetet tovább vittünk elektronmikroszkópos vizsgálatokra. MHC-immunpozitív axonok a septum minden területén jelen voltak, a legsűrűbb fonadékot a medialis septum és a LS dorsalis subnucleusában alkották. MCH-immunpozitív sejttesteket nem találtunk. Az axonok valószínűleg a már korábban a lateralis hypothalamusban azonosított neuronokból származtak. A varikózus axonok elektronmikroszkópban denz csapadéktartalmuk alapján azonosíthatók voltak. Ezek aszimmetrikus szinapszisokat hoztak létre posztszinaptikus célelemeikkel, leggyakrabban negatív dendrittüskékkel. Az immunreaktív axonok egyenletes denzitásban frodultak elő a septum rostrocaudalis tengelye mentén. A táplálékmegvonás az MCH-pozitív axonok szignifikáns denzitás növekedését okozta. Eredményeink jó egyezésben vannak korábbi irodalmi adatokkal, melyek hasonló eredményeket közölnek a hypothalamikus táplálékfelvételi központok esetében. Adataink megerősítik azokat a korábbi megfigyeléseket, melyek szerint a hypothalamus mellett az LS is fontos szerepet játszik az étvágy és táplálékfelvétel szabályozásában. Előadások listája |