A természetes immunválasz modulálás hatása egérbe implantált tumorsejtek növekedésére
Mészáros László VI. évfolyam
NÉBIH-ÁDI; Állatorvostudományi Egyetem, Járványtani és Mikrobiológiai Tanszék
Témavezetők: Dr. Dénes Béla, Gulyás Dominik

Absztrakt:

Bemutatás és célok:

Az egészséges szervezetben naponta több ezer daganatosan transzformálódott sejt képződik, ugyanakkor az egészségesen működő immunrendszer ezeket képes felismerni és elpusztítani. Ez a megfigyelés adja a daganat ellenes immunterápia alapját, melynek lényege az immunrendszer stimulálása, ami történhet tumorspecifikus antigének vagy univerzálisan immunválaszt kiváltó anyagok segítségével. Kísérletünkben két patogén-asszociált molekuláris mintázatok (PAMP) csoportjába tartozó molekula hatását vizsgáltuk egy monoklonális anti-OX40 ellenanyaggal kombinálva. A kezelések során különböző kombinációkat alkalmaztunk, amelyek összetevői a következőkből álltak: metilálatlan CpG oligonukleotid; Toll-like receptor 9 (TLR9) ligand; lipopoliszacharid (LPS) – amit a TLR-4 ismer fel, valamint az anti-OX40 – a regulátor T-sejtek felületén található receptorra specifikus ellenanyag. Kísérletünk célja az volt, hogy be tudjuk bizonyítani a kezelt állatok medián túlélési idejének szignifikáns növekedését az MB49 egér hólyag karcinoma sejtvonal esetében.

Módszer:

A kísérlet során egerenként 1x107 számú élő sejtet implantáltunk szubkután, 0,2 ml sejtszuszpenzió formájában az állatok bal combjába. Megfigyelési csoportonként 10-10 db C57BL6 egeret használtunk. Tizenegy nappal a tumor beültetés után a daganatos elváltozást mutató egereket (0,5-0,8 cm-es tumor-átmérőnél) három alkalommal 50 µg CpG + 5 µg anti-OX40, illetve 500 ng LPS + 5 µg anti-OX40 keverékkel, 3 napos időközzel intratumorálisan kezeltük. Ugyanakkor a kontroll csoport egerei nem részesültek kezelésben. Az elhullott egereket a túlélési idő feljegyzése mellett további kórbonctani és kórszövettani vizsgálatnak vetettük alá a metasztázis incidencia felderítése érdekében.

Eredmények:

A megfigyelési időszak 60. napjáig a kontroll és az LPS+anti-OX40 koktéllal kezelt csoportból minden állat elhullott, ugyanakkor a CpG+anti-OX40 csoportból öt állat életben maradt (50%). A túlélés medián értéke magasabb volt a CpG+anti-OX40 (60 nap) és a kontroll csoport (35 nap) esetében a LPS+A-OX40 kezelt csoporthoz (32 nap) viszonyítva. Statisztikailag szignifikáns különbség mutatkozott a CpG+anti-OX40-nel kezelt csoport és a kontroll (p<0,05), valamint az LPS+anti-OX40-nel kezelt csoport között (p<0,05). Nem találtunk szignifikáns eltérést az LPS+anti-OX40 és kontroll csoport eredményei között.

A megfigyelési időszak végéig (142 nap) a CpG+anti-OX40 csoportból további két egér hullott el, illetve került kiirtásra rossz általános állapot miatt. A kísérletet túlélő 3 állat azóta is tumormentes.

Következtetés:

A CpG és az anti-OX40 elegye kifejezett tumorellenes aktivitást mutat az LPS+anti-OX40-hez és a kontrollhoz képest MB49-es sejtvonal esetén. Az LPS-el történő kezelés nem növelte az anti-OX40 hatékonyságát és nem okozott szignifikáns élettartam növekedést.

Előadások listája