2020. évi TDK konferencia

Az antibiotikum rezisztencia kialakulásának lassítása a jelenkor egyik legfontosabb feladata a humán- és állatorvoslásban egyaránt. Számos Európai Uniós útmutatást adtak ki a helyes antibiotikum alkalmazásról, valamint a praktizáló állatorvosok antibiotikum felhasználásának szigorítása is fontos célja a 2022-ben hatályba lépő, állatgyógyászati készítményekről szóló 2019/6 EU rendeletnek. Ezáltal sok vizsgálat tárgyát képezi antibiotikumokat helyettesítő, vagy az antibiotikumterápiát kiegészítő készítmények felkutatása, és ezek hatékonyságának bizonyítása. A mi kísérleteink is egy, a humán szakirodalom alapján ígéretes antioxidáns és baktériumellenes aktivitású flavonoid vegyület, a luteolin hatásainak felderítésére irányultak, amely a jövőben potenciális antibiotikum alternatívaként szolgálhat az állatgyógyászatban.

Nagyüzemi haszonállattartásban a bakteriális fertőzések által a bélhámsejtekben okozott gyulladás és oxidatív stressz veszélyezteti az állatok egészségét. Humán vonalon végzett kutatások alapján úgy gondoltuk, hogy a luteolin eredményesen alkalmazható antioxidáns szerként csökkenthetné ezen fertőzések káros következményeit. Feltevésünk bizonyítására intracelluláris reaktív oxigén származékok (ROS) mennyiségét mértük in vitro bélhámsejt-tenyészeten DCFH-DA próbával, bakteriális endotoxin (LPS) által kiváltott oxidatív stresszben. A bakteriális fertőzések következményeképp a bél barrier funkciója is sérülhet, ezért az IPEC-J2 sejteket membrán inzerten is tenyésztettük, és FD4 módszerrel ellenőriztük, hogy a luteolin képes-e a - szintén LPS-sel - kiváltott integritás károsodás mérséklésére. A bakteriosztatikus hatás vizsgálatához elvégeztük a luteolin minimális gátló koncentrációjának (MIC) meghatározását 8-8 Escherichia coli és Salmonella Typhimurium törzzsel szemben.

Kísérleteinkkel bizonyítottuk, hogy a luteolin in vitro csökkenti az intracellulárisan képződött ROS mennyiségét a S. Typhimurium LPS-sel kezelt csoporthoz képest 25 µg/ml, 50 µg/ml és 100 µg/ml koncentrációban. A luteolin, ugyanezen koncentrációkban a bélhámsejtek integritására is védő hatást mutatott LPS-sel történő kezeléssel szemben. A luteolin 256 µg/ml koncentrációban gátolni tudta a vizsgált baktériumtörzsek szaporodását.

A jövőben baktérium-bélhámsejt kokultúrán is tervezzük vizsgálni a luteolin antioxidáns és integritásvédő képességét, valamint további kísérleteket tervezünk különböző antibiotikumokkal az esetleges szinergista hatások felderítése érdekében.