Állatorvos szekciók

A mikotoxinok a gombák másodlagos anyagcseretermékei, melyek közül kiemelten fontos a Fusarium fajok által termelt dezoxinivalenol (DON). Elfogyasztása koncentrációtól, illetve időtől függően citotoxicitással, immuntoxicitással és a reprodukciós képesség csökkenésével járhat. Ezen káros hatások megelőzése céljából fontos olyan vegyületetek vizsgálata, amelyek képesek mérsékelni a toxinnal szennyezett takarmány elfogyasztása után jelentkező tüneteket. Ilyen vegyület lehet a baicalin (BAI), mely a Scutellaria baicalensis gyökerében található meg.

TDK munkám során a DON oxidatív folyamatokra gyakorolt, illetve a BAI védő hatásását vizsgáltuk csirke eredetű 3D májsejttenyészeteken. A sejteket két DON (2 és 20 µg/ml= DON2 és DON20), három BAI (5, 15 és 45 µg/ml=BAI5, BAI15 és BAI45) koncentrációval kezeltük 24 és 48 órán keresztül. A sejtek metabolikus aktivitását CCK-8 módszerrel, a sejtkárosodás mértékét pedig a laktát-dehidrogenáz (LDH) extracelluláris aktivitásának mérésével határoztuk meg, amely eredményekből a sejtek életképességére lehet következtetni. A nukleáris faktor eritroid-2-hez kapcsolódó faktor 2 (NRF-2) és a 8-hidroxi-dezoxi-guanozin (8-OHdG) mennyiségének mérésével pedig az oxidatív homeosztázis állapotát vizsgáltuk.

24 óra után a sejtek életképessége növekedett a kontrollhoz képest a BAI, illetve a kombinációs kezeléseket követően is, míg a DON a sejtek életképességének csökkenését eredményezte. 48 óra elteltével a BAI5 és a BAI45 hatására életképesség növekedést tapasztaltunk, illetve mindhárom koncentrációjú BAI kezelés DON-nal együttesen alkalmazva növelte a sejtek életképességét. A 24 órás inkubáció során a BAI kezelések csökkentették az LDH aktivitást, míg a DON20 növelte azt, mely növekedést a BAI45 mérsékelt. 48 óra után azonban mindkét alkalmazott DON koncentráció csökkentette az LDH enzim aktivitását, illetve a DON2-vel kezelt sejtekben a BAI45 hatására további csökkenést tapasztaltunk. Az NRF-2 szintje 24 óra elteltével a BAI45 hatására csökkent, míg a DON20 kezelés hatására növekedett. Továbbá, a DON2-vel kezelt tenyészetekben a BAI15, míg a DON20-al kezelt sejtekben a BAI15 és a BAI45 csökkentette az NRF-2 szintet. A 8-OHdG mennyisége 48 óra után mindkét DON koncentráció hatására csökkent, míg a BAI45 kezelés növekedést eredményezett. Emellett a DON20-al kezelt kultúráknál a BAI5 és a BAI45 a 8-OHdG mennyiségének növekedését okozta.

Eredményeink alapján elmondható, hogy a DON csökkentette a sejtek életképességét, de ez a hatás nem volt citotoxikus, és a BAI hozzáadása képes volt ezt a csökkenést mérsékelni. A DON negatív hatását a sejtek oxidatív állapotának befolyásolásán keresztül fejtette ki, mellyel szemben a BAI antioxidáns tulajdonsága érvényesült, azonban a 48 órás inkubációt követően a BAI esetében prooxidáns hatást is tapasztaltunk. Emellett eredményeink alapján feltételezzük,a hosszabb kitettséget követően a sejtekben védekező útvonalak aktiválódtak a homeosztázis fenntartása érdekében.