Állatorvos szekciók

A kutyák krónikus gyulladásos enteropátiájának (CIE) kezelése a modern kisállatgyógyászat fő kihívásai közé tartozik. A betegség során idült gyulladás keletkezik a béltraktusban, ami hosszú távon a bélbarrier károsodásához, bakteriális endotoxinok (LPS) keringésbe kerüléséhez, ezáltal endotoxémia kialakulásához vezethet, tovább súlyosbítva a krónikus gyulladásos folyamatokat. A CIE kezelésére különböző antibiotikumokat és immunszuppresszív szereket használnak, azonban ezek a hatóanyagok számos mellékhatással rendelkeznek, valamint az antibiotikumok használata hozzájárul a rezisztencia terjedéséhez is. Kísérleteink célja olyan gyógyhatású vegyületek keresése volt, amelyek a jövőben kiegészítő szerként jöhetnek szóba a CIE kezelése során. A polifenol vegyületek közé tartozó flavonoidok antimikrobiális, gyulladáscsökkentő és antioxidáns hatásáról a szakirodalom számos említést tesz. In vitro vizsgálataink tárgyául a vegyületcsoportba tartozó hatóanyagok közül a kvercetint, luteolint és a szőlőmag proantocianidineket választottuk.

Kutatásunkban először perifériás vérben található mononukleáris sejteket (PBMC) izoláltunk egy egészséges kutyából, majd a tenyészeten Escherichia coli eredetű LPS-sel gyulladást és oxidatív stresszt váltottunk ki, ezzel modellezve az endotoxémiát. Mindeközben a sejtkultúrákat kvercetinnel, luteolinnal és szőlőmag proantocianidinnel önmagukban, valamint LPS-sel kombinálva is kezeltük. A polifenolokat 25 és 50 μg/ml koncentrációban alkalmaztuk. A sejtek életképességét CCK-8 teszttel, a reaktív oxigén származékok mennyiségét (ROS) DCFH-DA próbával vizsgáltuk, ezután a sejtek felülúszójából ELISA módszerrel meghatároztuk a tumor nekrózis faktor-α (TNF-α) mennyiségét.

Kísérleteinkkel bizonyítottuk, hogy a kvercetin, a luteolin és a szőlőmag proantocianidinek in vitro, 25 és 50 μg/ml-es koncentrációban alkalmazva szignifikánsan csökkentik az intracelluláris ROS koncentrációt az LPS-sel kezelt csoporthoz képest. A TNF-α koncentráció mérésekor azt az eredményt kaptuk, hogy a gyulladás során megemelkedett TNF-α mennyiséget csak a luteolin csökkenti szignifikánsan 25 és 50 μg/ml-es koncentrációban az LPS-sel kezelt csoporthoz viszonyítva.

Összességében elmondhatjuk, hogy a kvercetin, a luteolin és a szőlőmag proantocianidin a jövőben ígéretes kiegészítő szerek lehetnek a kisállatgyógyászatban a kutyák krónikus gyulladásos bélbetegségének terápiájánál. Klinikai használat előtt azonban további in vitro és in vivo vizsgálatok szükségesek eredményeink megerősítésére.