Szekciók

Kutatásunk során kan kutyáktól gyűjtött mellékhere eredetű spermiumok fagyaszthatóságát vizsgáltuk. A mellékhere eredetű sperma fagyasztása az utóbbi időben egyre nagyobb figyelmet kap, mivel utolsó lehetőséget jelenthet a nagy tenyészértékkel bíró hím állatok esetében a genetikájuk megőrzésére, ugyanis a váratlanul elpusztult állatok örökítő anyaga is hozzáférhetővé válik ezen technika alkalmazásával.

Kísérletünk során 2025. május és 2025. szeptembere között 14 kutya mellékheréjét dolgoztuk fel az Andrológiai és Asszisztált Reprodukciós Laboratóriumban, amelyek közül végül 10 egyed adatait tudtuk felhasználni. A kutyák az Állatorvostudományi Egyetem Szülészeti Klinika ivartalanítási programjából származtak. Életkoruk 8 hónap és 5 év között, testtömegük pedig 1,9 és 27 kg között változott.

A kísérlet során két különböző fagyasztó médium hatékonysága került összehasonlításra; a szarvasmarhára törzskönyvezett Steridyl (Minitube) és a CaniRep Uppsala Equex II (CaniRep Hb) készítmény, amely kutyára törzskönyvezett. A mellékherékből módosított SESA (single incision epididymal sperm aspiration) technikával nyertük ki a spermiumokat, amiket 1 ml foszfátpufferelt sóoldatba tettünk. Ezután CASA szoftverrel (MICROPTIC S.L. SCA®) mértük a sejtek motilitását, valamint kenetek készültek morfológiai (Spermac-festés) és DNS vizsgálathoz (acridin orangefestés). A mintát két egyenlő részre osztottuk és a kétféle médiummal mélyhűtésre kerültek. A 0,25 ml-es műszalmákba töltött és folyékony nitrogénben tárolt mintákat később kiolvasztottuk kétféle protokoll szerint (felolvasztó médiummal vagy anélkül) és ugyanazon vizsgálatokon estek át, mint natívan.

A vizsgálatok statisztikai kiértékelése R-programmal történt. A natív minták vizsgálata során a progresszív motilitási értékek átlaga 26,88±4,97% volt, a koncentráció átlaga 268,95±163,07 x106/ml, míg az össz-sejtszámuk átlaga 268,5±163,84 x106 volt. A normál morfológia arány 72±11,39%, az akroszóma-integritás 96,7±4.74%, míg a DNS-integritás átlaga 99,2±0,79% értéket mutatott. A felolvasztás során készített kenetek morfológiai átlagai, mind a normál morfológiát tekintve, mind a DNS- és akroszóma integritást, nem tértek el jelentősen a natív mintában tapasztalt értékektől, p >0,05.

A progresszív motilitás felolvasztás után szintén nem mutatott szignifikáns különbséget a natív, illetve a fagyasztott minták között. Azonban a natív és a Steridyl-lel fagyasztott, fagyasztó médium nélkül felolvasztott minta össz-motilitása esetében szignifikáns (p=0.045) különbség mutatkozott (87,47±6,97% vs. 71,37±12,43%). Ugyanakkor felolvasztó médium hozzáadásával a különbség a natívhoz viszonyítva már nem bizonyult szignifikánsnak (87,47±6,97% vs.73,79±16,06%).

Az eredmények alapján megállapítható, hogy a szarvasmarhára törzskönyvezett Steridyl fagyasztó oldat kutya mellékhere eredetű spermium fagyasztása során hasonlóan jó eredményeket biztosított, mint a kutyákra törzskönyvezett CaniRep Uppsala Equex II készítmény.