Szekciók

A kutyák krónikus enteropátiája (CIE) hányással, hasmenéssel járó betegség, melynek kialakulásában több tényező is szerepet játszik, többek között a környezeti antigének, a szervezet kóros immunválasza és genetikai faktorok is. A CIE kialakításában részt vehetnek baktériumok is, mint például egyes Salmonella, valamint E. coli törzsek. A CIE konzervatív terápiája diétás tápláláson, továbbá antibiotikumok és az immunszuppresszív szerek alkalmazásán alapszik. Utóbbiak hosszú távú alkalmazása több kockázati tényezővel járhat, emiatt egyre inkább előtérbe kerülnek olyan kutatások, melyek növényi eredetű táplálékkiegészítők hatásait vizsgálják. Ilyen természetes vegyületek például a flavonoidok, melyek jótékony hatását már számos kutatás megerősítette. Kísérletünk célja az volt, hogy az általunk felhasznált flavonoidok, a kvercetin, a luteolin és a szőlőmagból kivont proantocianidin biztonságosságát, gyulladást és oxidatív stresszt csökkentő hatását bizonyítsuk kutya bél eredetű sejttenyészeten.

Kísérletünk során először bélbioptátumokat készítettünk egészséges emésztőrendszerű kutya duodenumából. A szövetmintákat 96-lyukú tenyésztőedényre helyeztük, majd E. coli és Salmonella eredetű LPS-sel kezeltük, mellyel a gyulladást és az oxidatív stresszt modelleztük. Az explant tenyészeteket kvercetinnel, luteolinnal és proantocianidinnel is kezeltük 25 és 50 μg/ml koncentrációban.A sejtek metabolikus aktivitását CCK-8 teszttel, a sejtek életképességét LDH aktivitás mérésével vizsgáltuk. Az intracelluláris reaktív oxigén származékok mennyiségét a DCFH-DA, az extracelluláris hidrogén-peroxid mennyiségét pedig az Amplex Red próba segítségével mértük. A TNF-α gyulladásos citokin mennyiségét a sejtfelülúszóból ELISA módszerrel határoztuk meg.

Kísérleteink során megállapítottuk, hogy az E. coli és Salmonella eredetű LPS által kiváltott gyulladás miatt szignifikánsan emelkedett intracelluláris oxigén származékok mennyiségét mind a három vizsgált flavonoid csökkentette, mindkét (25 és 50 μg/ml) koncentrációban alkalmazva. Az extracelluláris H2O2 mennyiségét egyedül a luteolin volt képes csökkenteni. A TNF-α mennyiségét az E. coli eredetű LPS szignifikánsan növelte a kontrollhoz képest, amit 25 μg/ml koncentrációjú luteolin kivételével az összes flavonoid csökkentett.

Eredményeink alapján a flavonoidok ígéretes kiegészítő szerek lehetnek a kutyák krónikus enteropátiájának kezelésében, de további in vivo vizsgálatok szükségesek ezen vegyületek állati szervezetre gyakorolt hatásának megértéséhez.