LPS által előidézett sejtszintű gyulladásos folyamatok és védő hatású anyagok tesztelése IPEC-J2 bélhámsejt modellrendszeren
Piros Andrea Gabriella IV. évfolyam
SzIE, Állatorvos-tudományi Kar, Gyógyszertani és Méregtani Tanszék
Témavezetők: Pásztiné Dr. Gere Erzsébet, Dr. Gálfi Péter

Absztrakt:

A probiotikumok hozamfokozóként való felhasználásának előnyeit már számos esetben igazolták. A bélrendszer fertőzéseinek megelőzésében és kezelésében kifejtett hatásában szerepet játszó mechanizmusok még nem teljesen ismertek. Kísérleti munkám célja egy olyan in vitro tesztrendszer kifejlesztése volt, mely alkalmas a Gram negatív baktérium sejtfal alkotó lipopoliszacharid (LPS) kezelés által előidézett gyulladásos folyamatok sejtszintű hatásainak folyamatos követésére, és a probiotikus baktériumok anyagcsere termékeik potenciális gyulladáscsökkentő hatásának tanulmányozására.

A vékonybélben lejátszódó komplex interakciók modellezésére poliészter membrán inzerten tenyésztett IPEC-J2 sejtvonalat alkalmaztam, amely újszülött, kolosztrumot nem kapott sertés jejunumából származik. Az LPS kezelés hatását a sejtréteg integritására transzepiteliális elektromos ellenállás méréssel és fluoreszcein izotiocianát-dextrán (FD4) átjutás vizsgálatokkal, a reaktív oxigén fajták (ROS) termelődésének mértékét az LPS által kiváltott gyulladásos folyamatban Amplex-red alapú fluorimetriás méréssel követtem nyomon. Kísérleteim során vizsgáltam, hogy a Lactobacillus plantarum 2142 és a Bacillus licheniformis CECT 4536 sejtmentes felülúszója valamint a nátrium-n-butirát milyen mértékben képes a sejteket az LPS által okozott károsodástól megvédeni.

Az apikális és bazolaterális kompartmenttel rendelkező 3D IPEC-J2 rendszer megbízható modellként szolgált a bélben zajló fiziológiás és patológiás elváltozások in vitro nyomon követésére. Az LPS számottevő ROS képződés nélkül idézte elő a sejt-egyrétegen keresztül a paracelluláris permeábilitás növekedését, melyet az FD4 apiko-bazolaterális transzport jelentős mértékű növekedése mutatott. A kis dózisban alkalmazott Bacillus licheniformis CECT 4536 sejtmentes felülúszó a bélbarrier integritásának erősítésén keresztül mérsékelte az FD4 átjutását. További kísérleteink célja számos probiotikumok bélbarrier erősítő és gyulladáscsökkentő hatásának vizsgálata, az állatgyógyászatban alkalmazható probiotikus anyagcseretermékek izolálása és szűrése.

Előadások listája