Probiotikumok és nátrium-n-butirát gyulladáscsökkentő hatásának modellezése vékonybélhám sejtkultúrán
Lencse Zsófia V. évfolyam
SzIE, Állatorvos-tudományi Kar, Gyógyszertani és Méregtani Tanszék
Témavezetők: Dr. Farkas Orsolya, Palócz Orsolya

Absztrakt:

Napjainkban az állatorvos-tudományban egyre nagyobb szerephez jutnak a probiotikumok mint az immun-, és az emésztőrendszer támogatói. Ennek legfőbb oka, hogy az Európai Unióban 2006. január 1-től betegségmegelőzés és hozamfokozás céljából egyaránt tiltott az antibiotikumok felhasználása. A probiotikumok jelenthetnek egy olyan alternatívát, mellyel e gyógyszerek helyettesíthetőek, esetleg kiválthatóak. Kísérleteink arra irányultak, hogy a patogén baktériumok által a bélhámban előidézett gyulladásos reakció mennyire védhető ki Lactobacillusok anyagcseretermékeivel.

Az IPEC-J2 sejteket kollagénnel bevont poliészter membrán inzerten tenyésztettük. A sejtréteg integritását transzepitheliális elektromos ellenállás (TER) méréssel követtük nyomon a növekedési szakaszban, és a kezelések alatt. A gyulladást bakteriális eredetű lipopoliszacharid (LPS) alkalmazásával váltottuk ki a sejtekben. Az LPS okozta gyulladás mértékét az IL-8 és a TNF-α relatív génexpresszió-változásának meghatározásával állapítottuk meg. A gyulladásos citokin gének kifejeződését a transzkripció szintjén qPCR (IPEC-J2 sejtekből), fehérje szinten szendvics ELISA módszerrel (bazolaterális tápfolyadékból) mértük. A vizsgált probiotikus baktériumtörzsek a következők voltak: Lactobacillus plantarum 2142 (Lp 2142), Lactobacillus plantarum 299v (Lp 299v) és Lactobacillus casei Shirota (Lc. Shirota).

A TNF-α és IL-8 gének relatív expressziója mind az 1 μg/ml, mind a 10 μg/ml LPS kezelés hatására szignifikánsan emelkedett. A probiotikus baktériumtörzsek és a Na-n-butirát gyulladáscsökkentő hatásának teszteléséhez a 10 μg/ml LPS kezelést választottuk. Az Lp 2142 13,3 v/v%-os felülúszója jelentősen csökkentette az IL-8 és a TNF-α génexpresszióját, míg az Lp 299v és az Lc Shirota alkalmazása esetében nem tapasztaltuk a fenti gének relatív expressziójának csökkenését. A sejtek Na-n-butiráttal (2mM) és LPS-sel történt együttes kezelése az IL-8 és a TNF-a gének relatív expressziójának csökkenését eredményezte.

Megállapítottuk, hogy az Lp 2142 felülúszója és a Na-n-butirát gyulladáscsökkentő hatással rendelkeznek. További célunk más nemzetségbe tartozó (pl. Bacillus, Bifidobacterium) baktériumok gyulladáscsökkentő hatásának vizsgálata modellrendszerünkben, valamint más gyulladást jellemző paraméterek vizsgálata (pl. IL-6 génexpresszió és koncentráció, TLR-4 receptor vizsgálata).

Előadások listája