2019. évi TDK konferencia

Az oltógyomorban élősködő Haemonchus contortus a legeltetett juh- és kecskeállományokban számottevő állategészségügyi és gazdasági kárt okoz világszerte. A parasitosis az utóbbi évtizedben kontinensünkön is az érdeklődés középpontjába került, ami a klímaváltozással és az anthelmintikumokkal szembeni rezisztencia gyakoribbá válásával függ össze. A H. contortus hazai jelenléte régóta ismert, de a mai napig nincsenek adatok a juhállományok fertőzöttségéről, állategészségügyi és gazdasági jelentőségéről. Petevizsgálattal e fonálféregfaj okozta parasitosis nem állapítható meg, - a harmadik stádiumú lárvák tenyésztése és morfológiai vizsgálata időigényes és nagy tapasztalatot igényel. Az országos kérdőíves felmérés mellett hazánkban elsőként alkalmazott kétféle molekuláris biológiai módszerrel vizsgáltuk az élősködő előfordulását juhállományokban.

A 911 kitöltött kérdőív közül hat helyről jelezték a haemonchosis előfordulását, a bántalomra jellemző vérszegénységet és áll alatti ödémát többen észlelték. Az ország 14 megyéjében tartott 37 állományban egy alkalommal ún. pool bélsármintákat gyűjtöttünk. A gyomor- és bélférgek strongylida-típusú petéit mini-FLOTAC módszerrel vizsgáltuk. Egy hely kivételével a többi mintában előfordultak strongylida-típusú peték. Összesen 10 juhászat mintáiból kimosott petékből NucleoSpin Tissue© (Macherey-Nagel) kittel történt a DNS kivonása. Hagyományos polimeráz reakcióval (PCR) és a DNS egy másik amplifikációs módszerével (Loop-mediated isothermal amplification, röviden LAMP) vizsgáltuk a H. contortus előfordulását. A PCR vizsgálatokban boncolás során talált adultokból kivont DNS-t használtunk pozitív kontrollként. A LAMP esetében pozitív kontroll a kit pozitív kontroll DNS reagense, negatív kontroll PCR víz volt. A petékből kinyert DNS-sel kapott PCR termékeket szekvenáltattuk. Összesen hat megye egy-egy olyan állományában állapítottuk meg a fonalféregfaj előfordulását, amelyről korábban nem tudtak.

Az országos kérdőíves és a hazánkban elsőként alkalmazott molekuláris parazitológiai vizsgálatok eredményei hozzájárulnak a jelentős kártétellel járó haemonchosissal kapcsolatos ismereteink bővüléséhez. A LAMP módszerrel rövid időn belül megállapítható az állományok H. contortus okozta fertőzöttsége. Ez a módszer a konvencionális PCR-hez képest 10-szer érzékenyebb, egy gramm bélsárban lévő két pete esetén is megbízható eredményt ad.