2019. évi TDK konferencia

A Mycoplasma hyorhinis sertések felső légúti baktériumközösségének természetes tagja, fakultatív patogén baktérium. A klinikai tünetek megjelenéséhez a tartási körülményekből fakadó stressz és egyéb társfertőzések jelenléte járul hozzá. Szisztémás megbetegedés jellemzően 3-10 hetes malacokban alakul ki, jellegzetes tünet a savóshártyák (mellhártya, szívburok, hashártya) fibrines gyulladása, ízületi gyulladás, ritkább esetben középfülgyulladás és kötőhártya gyulladás figyelhető meg. Az utóbbi években egyre nagyobb számban mutatják ki M. hyorhinis jelenlétét a tüneteket mutató malacokból. A fertőzés elleni védekezés alapja pedig a kórokozó alaposabb megismerése. A fertőzés forrásának megállapításához, járványtani kutatásokhoz elengedhetetlen genotipizáló módszerek fejlesztése. A jelenleg széles körben alkalmazott MLST (multi locus sequence typing) és MLVA (multiple-locus variable-number tandem repeat analysis) rendszerek jól standardizálható és laboratóriumok között összevethető, PCR alapú eljárások.

A szakirodalom alapján rendelkezésre áll MLST rendszer M. hyorhinis törzsek tipizálására. Az MLST módszer középtávú evolúciós távolságok feltárására, rokonsági viszonyok feltérképezésére alkalmas, a háztartási génekben előforduló pontmutációk alapján. Munkánk során 37 hazai M. hyorhinis izolátum MLST profilját határoztuk meg, mely alapján az egy telepről izolált törzsek azonos szekvencia típusokat mutattak.

Az MLVA intergenikus szakaszokban előforduló tandem ismétlődő szakaszok ismétlésszámának eltérése alapján különbözteti meg a törzseket. Munkánk során ilyen MLVA módszert fejlesztettünk M. hyorhinis genotipizálására hat régió bevonásával. Mivel ezek a szakaszok géneket nem kódolnak, gyakran fordulnak elő bennük mutációk, így rövidebb evolúciós távolságok felderítésére alkalmasak. A fejlesztett MLVA módszer érzékenysége 103-on kópia és más, sertésben gyakran előforduló Mycoplasma fajokkal (M. hyopneumoniae, M. hyosynoviae, M. flocculare) nem ad keresztreakciót, ezek alapján a módszer jól alkalmazható a diagnosztikai vizsgálatok során.

Az általunk megvizsgált 37 magyarországi M. hyorhinis izolátum MLVA elemzéssel készült törzsfa alapján az MLST elemzéshez hasonlóan a törzsek két fő csoportra oszthatók, a főcsoportokon belül azonban minden törzs külön szekvencia típust képvisel, elkülönítve az egy telepről különböző években izolált törzseket is. A fejlesztett MLVA rendszer így alkalmas az MLST törzsfa felbontására, és az MLST módszer kiegészítéseként, illetve járványtani nyomozásokban is jól alkalmazható.